目前正在实施食品安全国家标准食品添加剂食品添加剂决明胶GB31619-2014由中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布于2014年12月24日，2015年5月24日实施。该标准适用于以决明(Cassia obtusifolia或Cassia tora)植物的种子胚乳为原料，经萃取加工而成的食品添加剂决明胶。主要规定了决明胶的范围、技术要求(感官要求、理化指标、微生物限量)、检验方法等。

1范围

本标准适用于以决明(犆犪狊狊犻犪狅犫狋狌狊犻犳狅犾犻犪 或犆犪狊狊犻犪狋狅狉犪)植物的种子胚乳为原料，经萃取加工而成 的食品添加剂决明胶。主要含半乳甘露聚糖，即包含甘露糖线性主链和半乳糖侧链的聚合物。

2结构式

3技术要求

3.1感官要求

应符合表1的规定。

3.2理化指标

应符合表2的规定。

3.3微生物指标

应符合表3的规定。

附录A

检验方法

A.1一般规定

本标准除另有规定外，所用试剂的纯度应在分析纯以上，所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，应按GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备，试验用水应符合GB/T6682的规定。 试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。

A.2鉴别试验

A.2.1溶解性试验

不溶于乙醇。分散于冷水中，形成胶状溶液。

A.2.2凝胶试验

A.2.2.1在试样溶液中加入足量的硼酸钠(Na2B4O7·10H2O)试液(20g/L)，使溶液的pH超过9，溶 液形成凝胶。

A.2.2.2称取1.5g试样和1.5g黄原胶，混合均匀。在快速搅拌下，将混合物加入到盛有300 mL 80 ℃水的400mL烧杯中。搅拌至混合物溶解，继续搅拌30min(搅拌时溶液温度保持在60 ℃以上)。 停止搅拌并让混合物在室温下冷却至少2h。在温度降至40℃以下后，形成结实、有黏弹性的胶体。而 单独的10g/L试样对照液或黄原胶对照液均不形成此凝胶。

A.2.3pH

10g/L试样溶液的pH应为5.5～8.0。

A.3半乳甘露聚糖的测定

半乳甘露聚糖的质量分数狑1按式(A.1)计算：

w1 =100% -w2 -w3 -w4 -w5 -w6 ……………(A.1 )

式中：w2———干燥减量的质量分数，%;w3———灰分的质量分数，%;w4———酸不溶物的质量分数，%;w5———蛋白质的质量分数，%;w6———脂肪的质量分数，%。

A.4酸不溶物的测定

A.4.1试剂和材料

A.4.1.1硫酸。

A.4.1.2助滤剂：硅藻土，经105 ℃±2 ℃、3h干燥处理。

A.4.2仪器和设备

A.4.2.1过滤坩埚(经105 ℃±2 ℃、3h干燥处理)。

A.4.2.2干燥器。

A.4.3分析步骤

称取2.0g试样，溶于一盛有150mL水和1.5mL硫酸的250mL烧杯中。用表面皿盖上烧杯，在 蒸气浴上加热6h，加热过程中随时补充蒸发损失掉的水分。加热完成后，称取干燥处理后的助滤剂500mg，加入到试样溶液中，用已称重的过滤坩埚进行过滤。用热水洗涤滤渣数次，然后将坩埚连同滤 渣在105 ℃±2 ℃下干燥3h，在干燥器内冷却后称重。

A.4.4结果计算

酸不溶物的质量分数狑4按式(A.2)计算：

式中：

m1———干燥后坩埚连同滤渣的总质量，单位为克(g);

m2———助滤剂的质量，单位为克(g);

m3———坩埚的质量，单位为克(g);

m4———试样的质量，单位为克(g)。

A.5淀粉试验

A.5.1试剂和材料

碘溶液：称取碘14.0g，溶于含有碘化钾36.0g的100 mL水溶液中，加入3滴盐酸，加水稀释至

1000mL。

A.5.2分析步骤

称取试样1.0g，分散于10mL水中。加入碘溶液，无蓝色出现，即为通过试验。

A.6蒽醌的测定

A.6.1方法提要 用乙腈提取试样中的蒽醌，通过高效液相色谱法进行测定。 注：试样和对照品应避光保存。

A.6.2试剂和材料

A.6.2.1蒽醌对照品：大黄素(EMO)(纯度≥90%)、芦荟大黄素(AEM)(纯度≥95%)和大黄素甲醚

(PHY)(纯度≥98.0%)，或者1，8二羟基3甲氧基6甲基蒽醌、大黄酸(RHE)(纯度≥95%)和大黄根 酸(CHR)(纯度≥98%)。

A.6.2.2内标对照品：1，8二羟基蒽醌(纯度≥96%)。

A.6.2.3甲醇：色谱纯。

A.6.2.4乙腈：色谱纯。

A.6.2.5三氟乙酸。

A.6.2.6碳酸氢钠溶液：2g/L。

A.6.2.7乙腈/碳酸氢钠溶液：乙腈和碳酸氢钠溶液的体积比为60∶40。

A.6.2.8缓冲溶液：pH9.0。

A.6.3仪器和设备

高效液相色谱仪，配二极管阵列检测器(波长435nm)。

A.6.4参考色谱条件

A.6.4.1色谱柱：C18色谱柱，250 mm×4.6 mm，粒度5μm。或其他等同分离效果的色谱柱和色谱 条件。

A.6.4.2流动相：A+B;A为0.1%三氟乙酸溶液，B为乙腈。

A.6.4.3运行时间：60min。

A.6.4.4梯度：见表A.1。

表A.1流动相的浓度配比

A.6.4.5流速：1mL/min。

A.6.4.6进样量：50μL。

A.6.5分析步骤

A.6.5.1标准贮备溶液(100犿犵/犔)的制备

称取3种蒽醌对照品和内标对照品各1mg±0.01mg，分别用约5mL甲醇将对照品分别转移至

10mL的容量瓶中，超声处理15min后，加甲醇稀释至刻度。

此4份标准贮备溶液在4 ℃下贮存于棕色瓶中(此条件下溶液可稳定2周)。

A.6.5.2混合标准溶液(10犿犵/犔)的制备

3份蒽醌标准贮备溶液各吸取1mL，置于一个10mL的容量瓶中，加甲醇稀释至刻度。

A.6.5.3标准工作溶液的制备

取5个10mL的容量瓶，分别加入5mL、2mL、1mL、0.5mL和0mL混合标准溶液，再分别加入

1mL内标标准贮备溶液，混合后，分别加甲醇稀释至刻度。

A.6.5.4试样溶液的制备

称取约0.4g试样，精确至0.01g，置于一个50mL圆底烧瓶中。加入20mL三氟乙酸，在70℃下加热回流4h。将试样冷却至室温，并用旋转蒸发器蒸发至干。加入3mL乙腈/碳酸氢钠溶液，超声处 理30min。将溶液转移至一个离心管中，在5000r/min下离心30min。用事先经pH9.0的缓冲溶液 中和过的萃取柱(Merck，NT1或其他等效柱)过滤上清液。吸取900μL过滤后的试样溶液，置于一个2.5mL的小瓶中，加入100μL内标标准贮备溶液，充分混匀。

A.6.5.5标准曲线的绘制

在A.6.4参考色谱条件下，分别对各个标准工作溶液和内标标准贮备溶液进行色谱分析，记录色谱 图中各蒽醌及内标的峰面积。以各蒽醌与内标的峰面积比值对各个标准工作溶液浓度(mg/L)作标准 曲线。

A.6.5.6测定

在A.6.4参考色谱条件下，分别对试样溶液和内标标准贮备溶液进行色谱分析，记录色谱图中各蒽 醌及内标的峰面积。计算各蒽醌与内标的峰面积比值，根据标准曲线，得到各蒽醌的浓度。

A.6.6结果计算

各蒽醌的含量狑7 以毫克每千克(mg/kg)计，按式(A.3)计算：

式中：

c———根据标准曲线得到的试样溶液中各蒽醌的浓度，单位为毫克每升(mg/L);

3 ———试样溶液的体积，单位为毫升(mL);

1000———质量换算系数;

1000———体积换算系数;

0.9 ———取样体积，单位为毫升(mL);

m5 ———试样的质量，单位为克(g)。

由式(A.3)计算得到的各蒽醌的含量之和即为试样中蒽醌的含量。

A.7异丙醇的测定

A.7.1试剂和材料

A.7.1.1异丙醇：色谱纯。

A.7.1.2叔丁醇：色谱纯。

A.7.2仪器和设备

气相色谱仪，配有火焰离子化检测器。

A.7.3参考色谱条件

A.7.3.1色谱柱：填料为0.150mm～0.180mm(80目～100目)硅烷化的乙基乙烯苯与二乙烯苯共聚物或 其他等同物质，1.8m×3.2mm(内径)。或其他等同分离效果的色谱柱和色谱条件。

A.7.3.2载气：氦气或氮气。 A.7.3.3流速：80mL/min。 A.7.3.4进样口温度：200 ℃。 A.7.3.5柱温：165 ℃。 A.7.3.6检测器温度：200 ℃。

A.7.3.7进样量：5μL。

A.7.4分析步骤

A.7.4.1异丙醇标准溶液的制备

称取100mg异丙醇，置于一个装有约90mL水的100mL容量瓶中，加水稀释至100mL，混匀。

A.7.4.2叔丁醇标准溶液的制备

称取100mg叔丁醇，置于一个装有约90mL水的100mL容量瓶中，加水稀释至100mL，混匀。

A.7.4.3混合标准溶液的制备

吸取异丙醇和叔丁醇标准溶液各4 mL，置于一个100 mL容量瓶中，加水稀释至100 mL，混匀。 该溶液含异丙醇和叔丁醇各40μg/mL。

A.7.4.4试样溶液的制备

在一个盛有200mL水的1000mL圆底蒸馏烧瓶中，加入1mL合适的消泡剂，使其分散。加入准 确称量的约5g试样(精确至0.001g)，振荡1h。将此烧瓶与分馏柱相连，调节温度，使泡沫不进入柱 子，接馏出液约95mL。在馏出液中加入4mL叔丁醇标准溶液，加水补充至100mL，即得试样溶液。

A.7.4.5测定

在A.7.3参考色谱条件下，分别对混合标准溶液和试样溶液进行色谱分析。记录各色谱图中异丙 醇和叔丁醇的峰面积值。

A.7.5结果计算

A.7.5.1响应因子的计算

响应因子f按式(A.4)计算：

A.7.5.2异丙醇含量的计算

异丙醇含量狑8以毫克每千克(mg/kg)计，按式(A.5)计算：